樊曾刚,李慧,李少华,周浩,李雅君,刘辉
(深圳馥稷生物科技有限公司,广东 深圳 518133)
摘要 本文主要研制出以香茅油为主要活性成分防蚊固体清新剂;采用“Y”型管、圆筒法测定了其对白纹伊蚊的驱避活性。实验结果如下:以15.0%香茅油、 1.0% 结冷胶、20.0% 氢化蓖麻油-40制成的防蚊固体清新剂(A-1)从外观、硬度、稳定性都较佳,采用“Y”型管测试,表明A-1对白纹伊蚊的驱避率均超过75.0%;采用圆筒法测试,表明其驱避率超过67.0%。因此,本产品对白纹伊蚊具有较好的驱避作用,值得进一步研究开发。
关键词:香茅精油, 固体清新剂,驱蚊。
The manufacture and repellent activity to mosquito of citronella oil solid air freshening agent
Fan zeng-gang, Li hui, Li shao-hua, Zhou hao, Liu-hui
(Fuji biotechnology co. Ljd., Shenzhen 518133,China)
Abstract In this paper, the citronella oil solid air freshening agent (A-1)was made, and repellent activity of it against Aedes albopictus Skuse were evaluated using “Y”-tube olfactometer and cylinder method . The results showed that the citronella oil solid air freshening agent what contained 1.0% gellan gum, 20.0% hydrogenated castor oil to 40, 15 .0% citronella oil and water had better appearance, hardness and stability. By “Y”-tube olfactometer, A-1 repellent rate was over 75.0%; through the cylinder method, its repellent rate was more than67.0%. Therefore, the citronella oil solid air freshening agent was worthy of further estimation.
Keywords:Repellent activity;Solid air freshening agent;Citronella oil.
蚊虫是古今中外危害人民健康的病媒传播源之一,能够传播疟疾、登革热、寨卡病毒等多种疾病,在盛发季节更是干扰人们正常的安宁生活和身心健康。伴随着人们的生活水平的不断提高,人们对于安全、环保、健康的意识不断加强。而市场上驱蚊产品的多样化让人眼花缭乱,且市场上多数产品是以化学农药为主,对人体的安全性,及对环境是否有影响受到消费者的担忧。而应用植物来防蚊虫已由来已久,像燃烧艾蒿熏杀蚊虫、挂香囊防蚊虫、涂抹植物汁液防蚊等等。标有植物源、天然等字样的环境友好型防蚊剂,受到人们的广泛青睐。近年来,随着药用植物挥发油开发,受到越来越多的研究学者关注,并取得了一定的进展,现已逐渐应用于抑制蚊虫等领域。本文主要讲述一种用植物挥发油制作的防蚊固体清香剂(下文简称为防蚊固体清新剂),为防蚊产品剂型的开发提供参考。
1、材料与方法
1.1 主要材料与仪器
实验材料:结冷胶、香茅精油、无水乙醇、吐温-80、氢化蓖麻油-40、氢化蓖麻油-60、增溶剂PB-509(上海艾高日化有限公司)、色素。
实验仪器:“ Y”型管、LZB-3WB型玻璃转子流量计、玻璃圆筒、电子表、电子天平、颗粒吸附碳、真空抽气泵、无味硅胶管、吸蚊器、钢丝沙网等。
1.2 标准试虫
淡色库蚊(Aedes albopictus)从北京疾病预防控制中心引种,在西北农林科技大学无公害农药研究服务中心养虫室内(T:26±1℃,RH:65±5.0%,12L:12D)饲养,试验选取羽化后3~5天整齐一致未吸血的健康雌蚊。
1.3实验方法
1.3.1 防蚊固体清新剂的制备
根据结冷胶的凝胶特性,以及参照王奎堂的方法制作防蚊固体清新剂。先将乳化剂与香茅油、乙醇混合作为组份1待用;再将蒸馏水与结冷胶混合作为组份2;将组份2加热溶解搅拌均匀后停止加热。待组份2温度降到75℃左右将组份1缓慢加入到组份2中,边加边搅拌,可加入适量色素,搅拌均匀后,倒入磨具中让其自然冷却即得所需防蚊固体清新剂。
1.3.2 挥发度的测试方法
将制作好的防蚊固体清新剂放置于室温25-27℃的环境中下让其自由挥发,每间隔24小时进行称重测重,即计为每天的挥发量。
挥发量=前一次测重-本次测重
1.3.3 防蚊固体清新剂的活性测试方法
1.3.3.1 “Y”型管
通过Y”型管(参考F.Erler 2006;余静等2008;付臣臣2013等设计)测试香茅油防蚊固体清新剂对淡色库蚊成虫的驱避活性。测试装置由“Y”型管、真空抽气泵、净化管和无味硅胶管连接组成。
具体操作如下:先将20头雌淡色库蚊引入“Y”型管中,在精确称取0.4g固体清新剂放入一侧样品室,另一侧样品室为空白对照。加入供试样品后立即开启抽气装置并计时,外界空气经净化管中的活性炭吸附净化、加湿后,通过两侧支管进入“Y”型管的主管。记录5、10、15、20min两侧支管的蚊虫数目,实验完毕清洗装置。每处理设3次重复,调换“Y”型管两侧支管的位置,以消除几何位置对蚊虫趋向行为的影响。随后在分别测试固体空气清新剂在室温下敞开放置5d、10d、15d、20d、25d后对淡色库蚊的影响。
驱避率(Percentage repellency)计算公式:
PR=(Nc-Nt)/ (Nc+Nt)×100%
Nc代表对照臂中蚊虫数目;Nt代表处理组蚊虫数目
1.3.3.2 串联圆筒法避蚊测试
参考苏毅生的空间驱避蚊效测试方法,并进行一定改进,具体如下:将3个直径21cm,长度43cm,两个直径为21cm,长度为17cm的透明圆筒串联,3个长圆筒间用挡板隔开并且两端用沙网挡住,放蚊虫一端加入一个用挡板挡住的密闭圆筒,如图1。其中2号圆筒内放入30只雌蚊,待蚊虫稳定后,同时抽开3个挡板,拉到中心直径为5cm小洞处。然后将待测药放入1号圆筒中开始计时,分别记录 30min、60min、90min、120min每个圆筒的中的蚊虫数量。为放药的作为空白对照,计算放药前后对圆筒中的蚊数驱避的影响。重复,清洗装置。
驱避率(Percentage repellency)计算公式:
PR%=(Nc-Nt)/ (30-Nd) ×100%
注:Nc代表放药后3~5号圆筒中蚊虫数之和;
Nt代表放药前3~5号圆筒中蚊虫数之和;
Nd代表放药后2号圆筒中蚊虫数。
图1串联圆筒装置图
2 结果与分析
由于防蚊固体清新剂主要受三个因素影响,分别是:结冷胶含量、乳化剂、精油含量,因此分别对他们种类及含量进行筛选。
2.1 结冷胶用量的确定
结冷胶的是制作凝胶最主要的成型剂,以不同含量0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%的结冷胶,制作出的凝胶效果有所差异。随着结冷胶含量的提高凝胶状态发生改变,从可流动的粘稠液到可成型的半固态。用量在0.8%-1.0%时最适合,用量高于1.0%虽然硬度、韧性能更好但不利于搅拌并增加了制作成本,用量低于0.8%硬度不够并且凝胶渗水严重,低于0.6%成透明的粘稠液,状态不理想。
2.2乳化剂的选择
在1.0%结冷胶含量下,通过从外观、软硬度、成型状态等进行比较,选择出制作固体清新剂合适的乳化剂。制作配方见下表1。
表1 不同乳化剂制作配比
RH-40 (%) | RH-60 (%) | T-80 (%) | PB-509(%) | 结冷胶(%) | 蒸馏水(%) | |
配方A | 5 | - | - | - | 1 | 94 |
配方B | - | 5 | - | - | 1 | 94 |
配方C | - | - | 5 | - | 1 | 94 |
配方D | - | - | - | 5 | 1 | 94 |
配方E | 10 | - | - | - | 1 | 89 |
配方F | - | 10 | - | - | 1 | 89 |
配方G | - | - | 10 | - | 1 | 89 |
配方H | - | - | - | 10 | 1 | 89 |
配方I | 15 | - | - | - | 1 | 84 |
配方J | - | 15 | - | - | 1 | 84 |
配方K | - | - | 15 | - | 1 | 84 |
配方L | - | - | - | 15 | 1 | 84 |
配方M | 20 | - | - | - | 1 | 79 |
配方N | - | 20 | - | - | 1 | 79 |
配方O | - | - | 20 | - | 1 | 79 |
配方P | - | - | - | 20 | 1 | 79 |
配方Q | 25 | - | - | - | 1 | 74 |
配方R | - | 25 | - | - | 1 | 74 |
配方S | - | - | 25 | - | 1 | 74 |
配方T | - | - | - | 25 | 1 | 74 |
按照配方将乳化剂与结冷胶、水进行加热搅拌混合,制作出的凝胶进行比较。四种乳化剂RH-40、RH-60、T-80、PB-509对凝胶的影响都是随着用量的提高,凝胶状态从可流动状态到半凝固状态在到粘稠状态发生改变。其中PB-509不同含量制出的都是细腻平整光亮的乳白色凝胶,但静置后渗水严重。而RH-40、RH-60、T-80制作出来的较透亮,且RH-40的从外观、软硬度、成型状态效果最好。
在20.0%含量下,RH-40、 RH-60制成的凝胶较理想,低于20%凝胶发白不透亮,高于20.0%无法制成凝胶。但在20.0%含量下,RH-60制作的凝胶表面不平整,容易产生气泡。而T-80用量在10.0%较理想,泛黄现象较轻。T-80用量在低于10.0%不透亮并且凝胶状态不稳定,过高则泛黄严重并粘手,表面褶皱不平整。总体上从外观透亮度及用量稳定性判断,这三种乳化剂比较RH-40能更适合制作凝胶。
2.3香茅精油含量的确定
在以上的基础上选则出较理想的用量并与精油进行复配:20.0% RH-40,10.0%无水乙醇,1.0%结冷胶,在分别与5.0%、10.0%、15.0%、20.0%的精油复配,用蒸馏水补齐到100.0%。通过制作后进行对比,在乳化剂用量相同情况下,随着油的含量提高凝胶的透亮度降低,外观及表面平整度都有所变差,低于10.0%气味过于清淡,高于15.0%影响外观成型状态,经过对比精油含量在10.0%~15.0%最理想。
2.4防蚊固体清新剂最终配方
按照防蚊固体清新剂的制备方法,以1.0%结冷胶,20.0%RH-40,15.0%香茅精油,少许色素,用蒸馏水补齐到100.0%,制得防蚊固体清新剂(A-1)。制作出的成品效果如图2所示:
图2香茅油防蚊固体清新剂
2.5 A-1与A-2挥发量比较
以自制的防蚊固体清新剂为A-1与市场买到的固体空气清新剂为A-2,在室温下进行自由挥发测试,进行挥发量比较,结果如下表2:
表2 A-1与A-2挥发量
挥发量(g) | ||||||
5d | 10d | 15d | 20d | 25d | 30d | |
A-1挥发量 | 11.39 | 3.95 | 1.85 | 0.93 | 0.61 | 0.58 |
A-2挥发量 | 14.35 | 2.08 | 3.42 | 5.68 | 4.53 | 4.63 |
通过表4,自制的A-1与商场购置的A-2,经过25天的观察比较,自制品的挥发量慢并且留香持久,使用时间有所延长。
2.6防蚊固体清新剂的活性测试方法
2.6.1 “Y”型管测试
按照实验方法测得15.0%香茅油固体清新剂,驱蚊测试数据结果见下表3。
表3 “Y”型管驱蚊测试数据
驱避率(%) | ||||||
5d | 10d | 15d | 20d | 25d | 30d | |
5min | 100 | 88.9±19.2 | 88.9±19.2 | 100 | 87.8±21.0 | 84.4±14.5 |
10min | 79.2±11.6 | 95.6±7.7 | 93.3±11.5 | 100 | 88.8±9.8 | 93.3±11.5 |
15min | 77.0±3.4 | 77.7±11.7 | 92.6±12.8 | 77.8±9.6 | 75.6±13.9 | 77.2±7.7 |
20min | 92.1±6.8 | 92.1±6.8 | 82.5±11.5 | 75.3±13.1 | 96.1±6.8 | 78.0±6.7 |
通过测试结果可以看出,对淡色库蚊的空间驱避活率达到80.0%左右,经过室温放置30d后驱蚊固体清新剂变干皱缩,防蚊活性变化不大,防蚊效果仍保持在80.0%左右。
2.6.2串连圆筒法驱蚊测试
按照实验方法测试A-1数据如下表4,可以看出防蚊固体清新剂驱蚊活性在70.0%左右,效果良好。随着时间的延长及圆筒中空间活性物质浓度的提高,驱赶蚊虫的数量增强,驱避率增大。该测试装置可干扰因素较少,因此测得的驱避率可靠性较好,测得的效果能更接近实际使用情况。
表4串连圆筒法测试数据
状态 | 时间 | 5号圆筒蚊虫数 | 4号圆筒蚊虫数 | 3号圆筒蚊虫数 | 2号圆筒蚊虫数 | 驱避率(%) |
未放药,打开挡板 | 30min | 2 | 1 | 2 | 25 | —— |
60min | 3 | 2 | 3 | 22 | —— | |
90min | 3 | 2 | 1 | 24 | —— | |
120min | 7 | 1 | 1 | 21 | —— | |
放药后,打开挡板 | 30min | 14 | 4 | 5 | 7 | 78.2 |
60min | 12 | 9 | 5 | 4 | 69.2 | |
90min | 17 | 5 | 2 | 6 | 75.0 | |
120min | 21 | 4 | 3 | 2 | 67.8 |
3讨论及结论
近年来,植物精油作为天然驱蚊剂的研究显著增多并取得了一定的进展,已逐渐用于抑制蚊虫领域。本文基于植物挥发油香茅油天然安全无害,驱蚊效果良好等优点,作为制作固体清新剂主要活性物质,制作的固体清新剂配方如下:1.0%结冷胶,20.0%RH-40,15.0%香茅精油,少许色素,用蒸馏水补齐到100.0%。通过两种测试方法可知: “Y”型管测试驱避率在80.0%左右,圆筒法测试驱避率在70.0%左右,具有良好的驱蚊活性。同时,对于防蚊固体清新剂的测定方法目前没有相应的活性测试方法,因此,本文中对于防蚊固相剂的测试方法可作为驱蚊手环、驱蚊腕带、驱蚊贴等此类驱避产品的药效评定。目前市场中植物精油防蚊固体清新剂的产品暂未发现,基于固体清新剂具有水基化、固体化、缓释化的优点,具有广阔的开发应用前景。
参考文献
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[3] 刘辉,晏许超,李慧,吴华,冯俊涛-9种植物精油对白纹伊蚊驱避活性的研究-.卫生杀虫药械2015(1);17-20
[4] 付臣臣-11种植物精油驱蚊活性筛选及制剂研究- 2013
[5] 马卫宾-植物精油对淡色库蚊的生物活性及天然蚊虫防控剂研发-.2014
[6] 许春晖、欧祥平复方植物精油驱蚊效果研究.卫生杀虫药械2014(3):243-244
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